Mikrobioloogia osakond
Uuritav materjal, selle võtmine, saatmine ja säilitamine
Proovinõu | Bactec AER pudel (hall kork), Bactec AN pudel (lilla kork/oranž kork), Bactec MYC pudel (roheline kork), Bactec PED pudel (roosa kork) |
Säilivus | Transportida toatemperatuuril võimalikult kiiresti laborisse |
Verekülviks kasutatavad söötmed
Üks verekülv = ühel punktsioonil võetud verekogus.
Täiskasvanud patsiendil tuleb võtta ühel punktsioonil 20–30 mL verd (igasse pudelisse Bactec AER, Bactec AN või Bactec MYC 8–10 mL).
Lastel sõltub vajalik verekogus lapse kaalust (vt tabel). Võetud vere üldkogus ei tohiks ületada 1% ringleva vere mahust. Kogus võib olla väiksem, kui vastsündinu või laps on verekülvi võtmise hetkel sügavas aneemias.
Bactec PED pudelisse võib võtta 0,5–5 mL verd (soovituslik kogus 1–3 mL).
Kaal (kg) | Verekülv-1 verekogus (mL) | Verekülv-2 verekogus (mL) | Pudel | |
0,5–1 | 0,5–1 | - | Bactec PED | |
1,1–2 | 0,5–1 | 0,5–1 | Bactec PED | |
2,1–11 | 1–3 | 1–3 | Bactec PED | |
12–40 | 8–10 | 3–101 | Bactec AER (Bactec PED verekülv-2 vajadusel) | |
> 40 | 20–30 | 20–302 | Bactec AER, AN, MYC |
1 teise pudeli valikul arvestada võetava vere üldkogusega
2 võib lisada ka kolmanda verekülvi
24 tunni jooksul võtta 2–3 verekülvi, soovitavalt enne antimikroobse ravi algust.
Sepsise ja septilise šoki puhul peab võtma verekülvid ühe tunni jooksul enne antimikroobse ravi algust.
Verekülvid võib võtta samaaegselt punkteerides erinevaid veresooni. Verekülvide võtmisel ei ole erinevate külvide vaheline ajaintervall oluline.
Patsientidel, kellel kahtlustatakse veresoonekateetriga seotud vereringeinfektsiooni, tuleb külvata eemaldatud veresoonekateetri ots ja lisaks võtta eraldi punktsiooni teel verekülvid.
NB! Verd ei tohi võtta läbi veresoonesisese kanüüli või kateetri. Veresoonekateetrist on lubatud võtta verekülvid vaid vahetult uue kateetri sisestamise järgselt, kuid peab arvestama suurema kontaminatsiooniriskiga.
Verekülvi võtmine. Soovitav on võtta verd nii aeroobsesse (AER) kui ka anaeroobsesse (AN) söötmesse, süsteemse seeninfektsiooni kahtluse korral ka seente söötmesse (MYC).
Töödelda punktsioonikoht naha antiseptikumiga. Korgikatte eemaldamise järel tuleb iga pudeli kork eraldi desinfitseerida vähemalt 70% alkoholilahusega. Verekülvide võtmiseks kasutada turvalibliknõela. Pudelite täitmist alustada Bactec AER pudelist.
Bactec pudelis on vaakum, seetõttu tuleb vere võtmisel hoolikalt jälgida pudelisse kogutud vere kogust, kasutades selleks pudelil oleval kleebisel paiknevat 5 mL intervalliga märgistust. Pärast nõelahoidjast eemaldamist tuleb pudelit loksutada ringjate liigutustega, et veri seguneks söötmega.
Erandjuhul süstlaga punkteerimisel kasutada spetsiaalset turvanõela ja verepudelisse sisestamiseks spetsiaalselt süstla jaoks mõeldud turvasüsteemi. Vajalikud tarvikud saab tellida mikrobioloogia laborist. Süstla kasutamisel alustada pudelite täitmist Bactec AN pudelist.
Analüüsi tegemise aeg: tööpäeviti (esmaskülvid ka nädalavahetustel)
Analüüsimeetod
Inkubatsioon Bactec süsteemis. Positiivse signaali korral külv selektiivsetele ja mitteselektiivsetele söötmetele. Grami järgi värvitud preparaadi valgusmikroskoopia, mille tulemusest teavitatakse kohe raviarsti. Tekitaja samastamine, ravimitundlikkuse määramine. Lõplik vastus: negatiivne 5.–6. päeval (seente uuringu puhul 10. päeval), positiivne 3.–7. päeval.
Näidustus ja kliiniline tähendus
Baktereemia ja fungeemia kahtlus.
Naha normaalse mikrobioota hulka kuuluvad mikroobid Corynebacterium, Bacillus, Cutibacterium, Micrococcus, koagulaasnegatiivsed stafülokokid ja S. viridans grupp on harvainfektsiooni põhjustavateks patogeenideks. Nimetatud mikroorganismide isoleerimisel verekülvist tuleb vastuse interpreteerimisel arvestada patsiendi seisundit, kliinilist pilti ja invasiivsete vahendite olemasolu (nt veresoonesisesed kateetrid).
Võimalikud vead: proovi võtmine antimkroobse ravi foonil, uuringuks võetud ebapiisav vere kogus, vead säilitamisel ja transpordil, liiga suur kogus verd ühes pudelis (üle 10 mL).
Verekülviks kasutatavate söötmete üldised piirangud:
1. Proovi saastumine kogumise ja/või pudeli inokuleerimise käigus annab valepositiivse tulemuse.
2. Mittekultiveeritavad, aeglase kasvuga ja mitteeluvõimelised mikroobid, mis ei kasva kultuursöötmes või edasikülviks kasutatavas söötmes – valenegatiivne tulemus.
3. Mikroorganism ei tooda tuvastatavas koguses CO2 – valenegatiivne tulemus.
4. Leukotsütoosi puhul võib Bactec analüsaator anda valepositiivse signaali, subkultuurid annavad negatiivse tulemuse.
Lisaks:
• BACTEC PLUS aerobic/F*, BACTEC LYTIC/10 Anaerobic/F, BACTEC PEDS PLUS/F söötmes antikoagulandina kasutatav naatriumpolüanetoolsulfonaat (SPS) võib pidurdada sellele tundlike mikroobide (Gardnerella vaginalis, Neisseria gonorrhoeae, Neisseria meningitidis, Peptostreptococcus anaerobius, Streptobacillus moniliformis) tuvastamist. Nende mikroobide kahtluse korral kasutada maksimaalset vere kogust, kuna veri inhibeerib SPS toimet.
• BACTEC PLUS aerobic/F*, BACTEC PEDS PLUS/F – Haemophilus’e liigid vajavad kasvutegureid, mida saadakse vereproovist. Kui vere kogus on väike (≤ 3 mL BACTEC PLUS aerobic/F*pudeli korral ja ≤ 0,5 mL BACTEC PEDS PLUS/F pudeli korral), lisada vastav märkus ja labor kasutab toitelisandina FOS lisandit.
• BACTEC PLUS aerobic/F*, BACTEC PEDS PLUS/F – Streptococcus pneumoniae võib teatud juhtudel olla rutiinsetest subkultuuridest mitteväljakülvatav ja Grami järgi värvimisel mittenähtav. Kui on inokuleeritud ka anaeroobne pudel, on organism tavaliselt aeroobses väljakülvis tuvastatav.
• BACTEC PEDS PLUS/F – antibiootilise aktiivsuse neutraliseerimine resiinide poolt varieerub ja ei pruugi adekvaatselt neutraliseerida meropeneemi toimet. Resiinid neutraliseerivad flukonasooli toimet Candida albicans’i suhtes, teisi seenevastaseid aineid ja pärmseente kombinatsioone ei ole hinnatud.
• BACTEC Mycosis –IC/F ei ole optimeeritud dimorfsete seente edasikülvi jaoks.
Koostanud: Piret Mitt/Krista Lõivukene/Siiri Kõljalg
Muudetud 02.06.2025