Kontrast



Reavahe




Teksti suurus




Hoolivus, Uuendusmeelsus, Pädevus ja Usaldusväärsus

Kromosoomiaberratsioonid interfaasi kromosoomidel luuüdist ja verest (FISH)

Geneetika ja personaalmeditsiini kliinik, laboratoorse geneetika osakond, tsütogeneetika labor,  tel. 731 9496, www.kliinikum.ee/geneetika/

Mitmesuguste hematoloogiliste haiguse puhul on kromosoomide struktuuri- ja arvuanomaaliate esinemine luuüdi rakkudes oluline näitaja nii diagnostikas kui prognoosi hindamisel.

FISH (fluorescence in situ hybridization) kui molekulaar-tsütogeneetiline meetod võimaldab tuvastada muutusi, mis jäävad alla valgusmikroskoobi lahutusvõimet. Peamisteks tsütogeneetilisteks muutusteks on erinevate kromosoomide arvuanomaaliad, kromosoomide vahelised translokatsioonid, kromosoomi osade deletsioonid/duplikatsioonid/amplifikatsioonid ja inversioonid. Teatud kindlad muutused põhjustavad kindla fenotüübiga vähirakkude tekkimist. FISH meetodi puhul märgistatakse uuritavad lookused fluorestsentsmärgistega ja neid saab analüüsida fluorestentsmikroskoobis. Vastavalt märgise spetsiifikale on võimalik tuvastada kõiki eelpool nimetatud muutuste tüüpe.

Hematoloogiliste haiguste korral on oluline tuvastada tekkinud muutused kultiveerimata rakkudes, sest rakukultuuris võib selektiivselt mitteoluline rakuliin „üle kasvada“ ning patoloogiline rakuliin jääda tuvastamata. Vajadusel saab kasutada ka rakukultuuride materjali, eriti kui on tarvis täpsustada karüotüübi analüüsil leitud aberratsioone: täpsustada murrukohti, tuvastada markerkromosoomide päritolu jne. Oluline on, et iga analüüsi jaoks on vaja kindlat FISH-sondi ja iga analüüsiga saab vastuse ainult konkreetse sondi kohta. Hetkel kasutusel olevad FISH-sondid leiab tsütogeneetika labori saatekirjadelt.

Kuna on teada, et erinevate hematoloogiliste haiguste korral on olulised kindlad geneetilised muutused, siis FISH analüüsid on hõlpsamaks käsitlemiseks koondatud paneelidesse.

ALL (äge lümfoblastleukeemia) esmane paneel (FISH)

t(9;22) BCR-ABL1t(1;19) TCF3-PBX11q25 ABL2 muutused
t(12;21) ETV6-RUNX1t(17;19) TCF3-HLF9q34 ABL1 muutused
11q23 KMT2A muutused8q24  MYC muutused5q32 PDGFRB/CSF1R muutused

KLL (krooniline lümfotsüütleukeemia) paneel (FISH)

del TP53 (17p13)12. kromosoomi trisoomia
del ATM (11q22)del DLEU1 (13q14)

AML (äge müeloidleukeemia) paneel (FISH)

RUNX1-RUNX1T1 t(8;21)CBFB t(16;16), inv (16)del 5q (5q31,5q33)
11q23 KMT2A muutusedMECOM(EVI1) t(3;3); inv(3)(3q26)del 7q (7q22,7q36)
del TP53 (17p13)PML-RARa t(15;17)CREBBP (16p13.3) muutused

Hulgimüeloomi paneel (FISH)

NB! Analüüs tehakse CD138+ rikastatud materjalil

IGH (14q32) BreakFGFR3/IGH t(4;14)
delTP53 (17p13)MAF/IGH t(14;16)
CCND1/IGH t(11;14)Trisoomiad: D5S23, D5S721 (5p15.2) /CEP 9/CEP 15
CKS1B/CDKN2C 1q amp/1p del 

Lisaks paneelidele on kasutusel ka palju eraldi tellitavaid FISH-sonde. Samuti on võimalik paneelidel olevaid sonde tellida üksikult.

FISH sondide täisnimekiri on leitav:

Uuritav materjal, selle võtmine, saatmine ja säilitamine

KatsutiLH-katsuti (roheline musta rõngaga kork)
Analüüsitav kogus2–5 mL luuüdi (piisab ka karüotüübi määramiseks)
SäilivusEi säilitata! Proov saata võtmise päeval laborisse, äärmisel juhul võib seista toatemperatuuril 12 tundi
NB! Hulgimüeloomi diagnoosi korral saata kindlasti esimesel võimalusel laborisse

Analüüsi tegemise aeg: tööpäeviti, vastuse saamiseks kulub 2–3 nädalat, erandjuhtudel ja eelneval kokkuleppel üks nädal. Juhul, kui analüüsi tegemise käigus selgub lisaanalüüside vajadus, võib vastuse saamise aeg olla ka pikem.

Analüüsimeetod: hübridisatsioonikoha fluorestsentsmärgistamine (fluorescence in situ hybridization, FISH)

Vastuse vorm

Patoloogilise tulemuse korral antakse leiu sõnaline kirjeldus ja patoloogilise muutusega rakkude protsent analüüsitud materjalis.

Näidustus ja kliiniline tähendus

Ägeda või kroonilise lümfoproliferatiivse haiguse kahtlus, luuüdi transplantatsiooni edukuse või haiguse kulu hindamine.

Vt ka: Karüotüüp luuüdist

Koostaja: Pille Tammur
Muudetud 01.07.2024

linkedin facebook pinterest youtube rss twitter instagram facebook-blank rss-blank linkedin-blank pinterest youtube twitter instagram